细胞在运输过程中因温差，震荡，碰撞等原因可能会出现漂浮成团的现象，不用着急，T25表面消毒放入培养箱中平衡2-4h后按以下步骤操作即可恢复贴壁。

① 收集所有培养基及漂浮细胞到无菌50ml离心管，1000rpm，5min离心收集细胞沉淀。

② 取培养基上清到4℃保存，用于培养细胞，以平稳过度到客户自己的培养基。在原50ml离心管中加入5mlPBS重悬细胞沉淀，尽量吹散后1000rpm，5min离心，弃上清。

③ 加入1ml胰酶轻轻震荡混匀，勿直接吹打细胞，然后放入培养箱消化2-3min，消化完成后用移液器轻轻吹打几下，吹散细胞后立刻加5ml完培终止消化。1000rpm，5min离心，弃上清。

④ 加入1ml完培重悬细胞接种到新培养瓶中。T25加10-12ml培养基培养，通常2天左右换液一次，若培养基变黄及时换液，以维持一个相对稳定的培养条件，有利于细胞活正常生长。

注意：

原T25剩余贴壁细胞密度大于70%，可以正常消化传代；贴壁细胞较少可以加培养基正常培养至70%密度以上消化传代；若几乎没有细胞则可以丢弃。

若出现传代后次日贴壁较少的情况，可以收集培养基及漂浮细胞到离心管，离心收集未贴壁细胞，然后加新培养基尽量重悬吹散后接种回原培养瓶让细胞继续贴壁，注意小心操作，避免将已贴壁细胞吹下。

由于贴壁较弱细胞消化时间本身较短，必须控制消化时间和吹打力度，避免细胞消化或吹打死亡过多导致无法正常贴壁生长。

1.培养基营养不足以及pH值过低时会使细胞活力大幅度下降，建议加足量培养基培养细胞，特别注意培养基变黄后要及时换液；

2.换液时注意不要直接冲击到细胞表面以及过冷的试剂处理细胞，避免细胞回缩脱落；

3.细胞不要长时间高密度培养，70-80%密度左右即可传代，以维持细胞有较好的活性；

4.不要将细胞放置室温过久或经常挪动细胞，尽量让细胞静养。

5.细胞贴壁较弱，培养过程细胞通常呈聚集放射状生长，可能会有部分细胞漂浮生长；

6.建议使用TC表面处理的高贴培养瓶或明胶、多聚赖氨酸等包被的培养瓶培养细胞，有利于细胞贴壁生长。

【SNL-356】LNCaP clone FGC（人列腺癌细胞）

【SNLM-356】人列腺癌细胞用培养基

公 司 简 介

武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖区光谷生物城，注于细胞及系列产品的研发、生产和服务，公司建有标准化GMP实验室、动物房，已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证，获得技术企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。  

公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、培养基、辅助试剂等系列产品，提供细胞及培养配套产品一站式采购；细胞库冻存细胞系500余种，同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类；公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。  

公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司，不断为广大科研工作者提供优质的产品和服务！尚恩生物—您业的细胞供应商！